אנזים הגבלה – אנזימי רסטריקציה – Restriction enzymes הינם אנזימים – חלבונים שמזרזים תהליכים כימיים ביצורים חיים, אשר ביכולתם לחתוך מקטעי חומר תורשתי DNA במיקומים מסוימים.
אנזימי הגבלה מזהים שרשרת מסוימת של נוקלאוטידים בחומר התורשתי, נצמדים לDNA וגורמים לחיתוך רצף הנוקליאוטידים במקום בו האנזים נצמד אליהם.
